Cells-to-CT™ 1-步法 TaqMan™ 试剂盒
Cells-to-CT™ 1-步法 TaqMan™ 试剂盒
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Cells-to-CT™ 1-步法 TaqMan™ 试剂盒

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像 Cells-to-CT™ 产品系列的其他产品一样,借助 Cells-to-CT™ 一步法 TaqMan™ 试剂盒,无需 RNA 纯化即可直接使用培养细胞进行表达分析。该系列的这款新增产品包括了解更多信息
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货号反应次数
A25602400 次反应
A25603100 次反应
A2560520 次反应
货号 A25602
价格(CNY)
76,520.00
Each
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反应次数:
400 次反应
价格(CNY)
76,520.00
Each
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像 Cells-to-CT™ 产品系列的其他产品一样,借助 Cells-to-CT™ 一步法 TaqMan™ 试剂盒,无需 RNA 纯化即可直接使用培养细胞进行表达分析。

该系列的这款新增产品包括 TaqMan™ 一步法 RT-PCR 预混液。RT-PCR 步骤的单管形式以空前的方式简化了“样品至结果”工作流程。将简单的 Cells-to-CT™ 裂解技术与一步法 RT-PCR 预混液的快速循环能力相结合,可以在有限的样品处理条件下更快地得到结果。

Cells-to-CT™ 一步法 TaqMan™ 试剂盒的特点为:
•全面 — 优化的工作流程包括去除 gDNA 的细胞裂解试剂和 TaqMan™ 一步法 RT-PCR 预混液
• 超快速度 — 7分钟样品制备,包括 DNase 处理,与28分钟的实时 RT-PCR 步骤相结合,可实现 ∼35 分钟的样品至结果工作流程
• 简单 — 总共10步(样品制备和实时 RT-PCR 结合)
• 稳健 — 可以对每份样品 10–100,000 个细胞进行基因表达分析;结果与从纯化 RNA 中获得的相当
• 便利 — 含有足够的试剂,可对制备的每份细胞样品进行5次实时 RT-PCR;这可让您研究多种靶标或进行重复的 RT-PCR

注释:单独出售 TaqMan™ 引物/探针对。

简单7分钟样品制备,然后准备进行实时 RT-PCR
无论您使用的是孔板还是试管,Cells-to-CT™ 一步法 TaqMan™ 试剂盒均使用简单7分钟样品制备程序。该裂解技术专门设计用于 10–100,000 个培养细胞/样品。细胞先用 PBS 清洗,再于室温下置于裂解液中裂解5分钟,同时进行 DNase 处理。裂解过程在加入终止液,室温孵育2分钟后被终止。现在可以在实时 PCR 仪器上分析裂解物。只需将其添加到包含相关 TaqMan™ 引物/探针对的实时荧光定量 RT-PCR 预混液中。此外,裂解物也可以在 –20°C 下储存。由于样品直接在培养孔(96孔或384孔)里接受处理,样品处理错误、样品丢失可能性或转移错误极大程度减少,有利于快速高通量检测流程。与传统的多步骤 RNA 分离方案不同,无需加热、清洗或离心。该试剂盒大大简化了耗时费力的 30–60 分钟流程,将其缩短至7分钟。

经过验证的完整解决方案
Cells-to-CT™ 一步法 TaqMan™ 试剂盒的所有组分均经过优化,具有一致且可靠的性能。这样可以消除不同样品制备和实时一步法 RT-PCR 预混液组装过程中的猜测。为了进一步保证质量,Cells-to-CT™ 一步法 TaqMan™ 试剂盒已通过 TaqMan™ 基因表达测定试剂盒进行了验证,其性能与通过纯化 RNA 获得的性能相当。

附属产品
TaqMan™ Cells-to-CT™ 对照试剂盒设计与 TaqMan™ Cells-to-CT™ 产品配合使用。该试剂盒包含一个内源性对照 (ACTB),用于对样品装载可变性进行标准化,以及一个人工 XenoRNA™ 对照和相应的 TaqMan™ 基因表达测定,以监测 PCR 抑制的效果。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
适用于(设备)7500 Fast 系统、7500 系统、7900HT Fast 系统、7900HT 系统、QuantStudio™、ViiA™ 7 系统、StepOnePlus™ 系统、StepOne™ 系统、实时荧光定量 PCR 系统或热循环仪、7500 Fast Dx 系统、QuantStudio 6 和 7 Pro 系统、QuantStudio 7 Flex 系统、QuantStudio 3 和 5 系统、QuantStudio 12k Flex 系统、QuantStudio 6 Flex 系统
产品规格管装
环保功能所用资源更少、废弃物更少、危害更小
反应次数400 次反应
产品线Cells-to-CT™,TaqMan™
产品类型一步法 qPCR 试剂盒
数量400 preps
试剂类型细胞裂解
样品类型哺乳动物细胞
原始材料10-100,000 Cells
容量22 mL
检测方法引物-探针
适用于(应用)Gene Expression
高 GC PCR 扩增效果
PCR 方法一步法 RT-qPCR
反应速度快速,标准
Unit SizeEach
内容与储存
• 裂解液,22 mL,在 2–8°C 下储存
• Dnase I,220 µL,在 -5 至 -30°C 下储存
• 终止液,2 x 1 mL,在 -5 至 -30°C 下储存
• TaqMan™ 1 步法 qRT-PCR 混合物,10 mL,在 -5 至 -30°C 下储存

常见问题解答 (FAQ)

我的特定细胞系能用Cells-to-CT系统吗?

Cells-to-CT系统应该能适用于所有细胞系。但是,由于细胞大小和成分的差异,每个裂解反应的最大细胞数在不同细胞系中会有轻微差异。您可使用TaqMan对照试剂盒检测抑制和最小样品起始量。

使用Cells-to-CT试剂盒时是否要关注基因组DNA污染的可能?

Cells-to-CT技术的特色是在裂解培养细胞的同时,能够去除基因组DNA并保护RNA完整性。因此,如果您遵循实验方案中的裂解/DNase处理步骤,则无需担心qRT-PCR中存在基因组DNA污染。

What can I do to improve the sensitivity of my qPCR assay?

If you are targeting a low-abundance gene, you may have trouble getting Ct values in a good, reliable range (Ct > 32). To increase the sensitivity of the assay, you may want to consider the following:

- Increase the amount of RNA input into your reverse transcription reaction, if possible
- Increase the amount of cDNA in your qPCR reaction (20% by volume max)
- Try a different reverse transcription kit, such as our SuperScript VILO Master Mix, for the highest cDNA yield possible
- Consider trying a one-step or Cells-to-CT type workflow (depending on your sample type)

How do I set the baseline for my qPCR experiment?

Most times your instrument software can automatically set a proper baseline for your data. Check out our short video, Understanding Baselines, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=5BjFAJHW-bE).

How do I set the threshold for my qPCR experiment?

In most cases your instrument software can automatically set a proper threshold for your data. Check out our short video, Understanding Thresholds, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=H_xsuRQIM9M).